A4 - Ein Sandwich-Glyco-Immunoassay zur Detektion von Rizin in einem automatisierten Auslesesystem
- Event
- 11. Dresdner Sensor-Symposium 2013
2013-12-09 - 2013-12-11
Dreikönigskirche - Haus der Kirche Dresden - Chapter
- 1. Biosensorik und Point of Care
- Author(s)
- M. Hübner, R. Nießner, M. Seidel - TU München/D
- Pages
- 147 - 150
- DOI
- 10.5162/11dss2013/A4
- ISBN
- 978-3-9813484-5-3
- Price
- free
Abstract
Rizin ist ein pflanzliches Toxin, das im Samen der Rizinus-Staude entsteht. Es gibt kein Gegengift zu Rizin und es wurde bereits als Biowaffe angewandt. Um es in einer wässrigen Probe schnell nachweisen zu können, wurde ein Sandwich Glyco-Immunoassay zur Detektion in einem automatisierten Auslesesystem entwickelt. Dabei wird die Eigenschaft von Rizin als Lektin genutzt. Es bindet mit hoher Affinität an D-Galactose-Reste auf Zelloberflächen. Deshalb werden D-Galactose oder Lactose-Reste über Klick-Chemie mittels Kontaktdruck-Verfahren auf einer modifizierten Glas-Oberfläche immobilisiert. Für die Messung werden diese Kohlenhydrat-Mikroarrays in den Munich Chip Reader 3 (MCR 3) integriert. Dieses Gerät ermöglicht die automatische Durchführung des Sandwich-Glyco-Immunoassays und das Auslesen des Kohlenhydrat-Mikroarrays. Hierzu wird zunächst die wässrige Rizin-Probe über den Mikroarray geleitet. Anschließend wird ein Antikörper zugegeben, der gegen Rizin gerichtet ist und der mit Peroxidase markiert ist. Nach Zugabe der Substrate Wasserstoffperoxid und Luminol entsteht ein Chemilumineszenz-Signal, das über eine CCD-Kamera detektiert wird und mittels einer entsprechenden Software im angeschlossenen Computer ausgelesen werden kann. Das Signal kann ab einer Konzentration von 100 ng mL-1 Rizin detektiert werden, sodass tödliche Rizin-Dosen mit dem Sandwich Glyco-Immunoassay gemessen
werden können.